کلون و بیان پروتئین نو ترکیب ۲۸ کیلو دالتونی غشا خارجی بروسلا ملیتنسیس

نویسندگان

زهرا اذرنیاد

گروه میکروبیولوژی دانشگاه ازاد اسلامی واحد کرج، البرز، ایران اشرف مجتبی مبارز

گروه باکتری شناسی ، دانشکده پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران بهمن تبرایی

بخش واکسن سازی انیستیتو پاستور ، تهران، ایران نیما خرم آبادی

گروه باکتری شناسی ، دانشکده پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران هانیه آقا بابا

چکیده

زمینه و اهداف: بروسلوز یک بیماری زئونوز بوده و در بسیاری از کشورهای جهان از جمله ایران بعنوان بیماری بومی محسوب می شود. کنترل این بیماری وابسته به پیشگیری از موارد جدید بیماری و تشخیص بیماری می باشد. بررسی آنتی ژن های مختلف و فاکتورهای بیماریزایی سلول بروسلا، در پیشبرد اهداف پیشگیری، تشخیص و ریشه کنی این بیماری دارای اهمیت بالایی می باشد. در این تحقیق، پروتئین نوترکیب 28 کیلودالتونی غشای خارجی (omp28) بروسلا ملی تنسیس مورد بررسی قرار گرفته است.روش بررسی: ابتدا ژن 28 کیلودالتونی نوترکیب (omp28) بروسلا ملی تنسیس با آنزیم پرایم استار 21 تکثیر و سپس درون وکتور pjet 1.2 کلون شده و تعیین توالی گردید. ژن پروتئین هدف (omp28) از وکتور پلاسمیدی که مورد تایید قرار گرفته و بوسیله آنزیم های محدودالاثر طراحی شده، از روی پرایمرها خارج و در وکتور بیانی (+)pet8a کلون شد. پلاسمید حاوی ژن پروتئین هدف، در سویه اشریشاکلی بی ال 21 _ (دی ای 3) ترانسفورم شد و تولید پروتئین نوترکیب با ای پی تی چی القا و با روش اس دی اس پیج تایید شد. یافته ها: پس از واکنش زنجیره ای پلیمراز، ژل الکتروفورز 1% تکثیر ژن پروتئین 28 کیلودالتونی غشای خارجی (omp28) را با سایز مناسب تایید نمود. ترانسفورماسیون وکتورهای کلون شده در دو میزبان اشریشیاکلی دی اچ پنج الفا و اشریشیاکلی بی ال 21 ( ای ای 3) نیز با استفاده از واکنش زنجیره ای پلی مراز از روی کلونی ها مورد تایید قرار گرفت. بیان پروتئین نوترکیب 28 کیلودالتونی غشای خارجی (omp28) بروسلا ملی تنسیس با وزن مولکولی صجیج در میزبان اشریشیاکلی بی ال 21 انجام گرفته است. این پروتئین می تواند یک آنتی ژن مناسب برای تحقیقات واکسن و تشخیص سرولوژیک باشد.نتیجه گیری: با تخلیص نوترکیب حاصله و ارزیابی ایمنی زایی آن می توان از آن به عنوان یک کاندید واکسن استفاده نمود.

برای دانلود باید عضویت طلایی داشته باشید

برای دانلود متن کامل این مقاله و بیش از 32 میلیون مقاله دیگر ابتدا ثبت نام کنید

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

کلون و بیان پروتئین نو ترکیب 28 کیلو دالتونی غشا خارجی بروسلا ملیتنسیس

زمینه و اهداف: بروسلوز یک بیماری زئونوز بوده و در بسیاری از کشورهای جهان از جمله ایران بعنوان بیماری بومی محسوب می شود. کنترل این بیماری وابسته به پیشگیری از موارد جدید بیماری و تشخیص بیماری می باشد. بررسی آنتی ژن های مختلف و فاکتورهای بیماریزایی سلول بروسلا، در پیشبرد اهداف پیشگیری، تشخیص و ریشه کنی این بیماری دارای اهمیت بالایی می باشد. در این تحقیق، پروتئین نوترکیب 28 کیلودالتونی غشای خارجی...

متن کامل

کلون، بیان و تخلیص پروتئین سطحی ۳۶ کیلو دالتونی نوترکیب(omp۲b) بروسلا آبورتوس

زمینه و هدف: بروسلوز یکی از مهم ترین بیماری های زئونوز بوده که منجر به ضررهای اقتصادی فراوانی می شود. گونه بروسلا، باکتری های کوکوباسیل گرم منفی داخل سلولی هستند که قادر به تکثیر در فاگوزوم های ماکروفاژها می باشند و در بسیاری از گونه های حیوانی و انسان ها بیماری ایجاد می کنند. پیشگیری و تشخیص، هر دو لازمه ریشه کنی این بیماری می باشند. شناسایی و ارزیابی آنتی ژن های متفاوت سلول بروسلا در پیشبرد ب...

متن کامل

تعیین میـزان ایمنی‌زایـی واکسن ژنی دو گــانه حـامل ژن‌هـای پروتئین متصل شونده به پریپلاسم و پروتئین 31 کیلو دالتونی لایه خارجی بروسلا ملیتنسیس در موش‌های بالب ـ سی

تعیین میـزان ایمنی‌زایـی واکسن ژنی دو گــانه حـامل ژن‌هـای پروتئین متصل شونده به پریپلاسم و پروتئین 31 کیلو دالتونی لایه خارجی بروسلا ملیتنسیس در موش‌های بالب ـ سی مقدمه و هدف: بروسلا یک باکتری داخل سلولی اختیاری است که عامل بیماری بروسلوز بوده و می‌تواند در انسان و دام‌ها ایجاد عفونت نماید. سویه‌های تضعیف شده این باکتری نظیر بروسلا ملیتنسیس سویه Rev1 و بروسلا آبورتوس سویه‌های S19 و Rb51 هم ا...

متن کامل

کلون و بیان پروتئین غشای خارجی 31 کیلودالتونی بروسلا ملی تنسیس در اشریشیاکلی

  زمینه و هدف: شناسایی آنتی­ژن­هایی از بروسلا که بتوانند پاسخ ایمنی پروتکتیو تولید کند بسیار مورد علاقه محققین می­باشد. لذا بایستی آنتی­ژن­های مختلف بروسلا برای دستیابی به این اهداف مورد ارزیابی قرار بگیرد. در این مطالعه ما ژن 31 کیلودالتونی بروسلا ملی تنسیس M16 را در اشیرشیا کلی کلون و بیان نمودیم.   روش کار: ژن کدکننده پروتئین غشای خارجی 31 کیلودالتونی بروسلا ملیتنسیس با پرایمرهای اختصاصی تکث...

متن کامل

کلون و بیان پروتئین غشای خارجی ۳۱ کیلودالتونی بروسلا ملی تنسیس در اشریشیاکلی

زمینه و هدف: شناسایی آنتی­ژن­هایی از بروسلا که بتوانند پاسخ ایمنی پروتکتیو تولید کند بسیار مورد علاقه محققین می­باشد. لذا بایستی آنتی­ژن­های مختلف بروسلا برای دستیابی به این اهداف مورد ارزیابی قرار بگیرد. در این مطالعه ما ژن 31 کیلودالتونی بروسلا ملی تنسیس m16 را در اشیرشیا کلی کلون و بیان نمودیم.   روش کار: ژن کدکننده پروتئین غشای خارجی 31 کیلودالتونی بروسلا ملیتنسیس با پرایمرهای اختصاصی تکثیر...

متن کامل

کلون بیان پروتئین سطحی 31 کیلودالتونی بروسلا ملی تنسیس در اشریشیاکلی

زمینه و اهداف: بروسلوز بیماری مشترک بین انسان و دام است که از لحاظ اقتصادی و بهداشتی دارای اهمیت می باشد. پیشگیری از موارد جدید بیماری در انسان و دام برای ریشه کنی بروسلوز لازم و ضروری است.از مهمترین روش های پیشگیری استفاده از یک واکسن موثر و کم ضرر است. برای این منظور باید اقدام به شناسایی و ارزیابی ایمونولوژیکی انتی ژن های مختلف سلول بروسلا نمود. هدف از این تحقیق کلون و بیان پروتئین سطحی 31 ...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید


عنوان ژورنال:
مجله میکروب شناسی پزشکی ایران

جلد ۶، شماره ۳، صفحات ۷-۱۱

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023